双缩脲试剂的原理是双缩脲能够在碱性条件下和铜离子形成配合物形成紫色物质，在使用双缩脲试剂时候，必须注意先加0.1 g/mL氢氧化钠溶液形成碱性环境，再加0.01 g/mL硫酸铜的水溶液。(若先加入硫酸铜[CuSO4]溶液，再加入氢氧化钠[NaOH]溶液，则无法充分制造碱性环境，此时CuSO4会与NaOH发生复分解反应，生成蓝色氢氧化铜[Cu(OH)2]沉淀，导致现象不清，无法较好地达到实验目的.)。另外B液加2滴是因为过量会影响配位，影响实验现象。
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